紫外光分光光度计如何使用
2024-06-03 18:55:05 (40分钟前 更新)
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使用方法:开机步骤
1 开光谱仪电源
2 开计算机电源
3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作。
2 方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法。
1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描。
2)时间驱动(TIME DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学。
3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值。
4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度。
2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名。
2.2 方法的设定
2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动
各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示。
2.2.2 浓度
浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。
3 工具条
3.1 SETUP
当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态。
3.2 AUTOZERO
用鼠标指按此键,分光光度计即进行调零(在光谱扫描中则进行基线校正)。
3.3 START
用鼠标指按此键,光度计即开始运行所设定的方法。
4 方法运行
4.1 扫描,时间驱动,波长编程
方法选好后,先放入参比溶液,按AUTOZERO键,进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品,按START,分光光度计即开始进行,同时屏幕上出现图形窗口,将结果显示出来。
4.2 浓度
4.2.1制订标准曲线
1 方法选好后,确认各项数据正确,特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit mode”。再放入参比溶液,按AUTOZERO键自动校零或背景校正。
2 按setup,待该图标消失后,再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液,每次都按提示进行操作。
3 标准色列测定
完毕后,屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线,并标出各项标准管的位置,屏幕下方还有一条Concentration mode的对话框,可以用来修改拟合的曲线类型(按 change calbration),或修改标准溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加标准溶液管数(add)。如过已经满意,则按analyse sample键,进入样品测定窗口。
4 标准曲线有关的各项数据,均在calibresultwindow中,可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据,标准曲线的回程方程式,相关系数,残差。
4.2.2样品浓度测定
4.2.2.1刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时
1 只需在concentration mode对话框按analyse sample键,进入样品测定窗口。
2 按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。
3 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。
4.2.2.2利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时
4.2.2.2.1 调出所测定样品的浓度方法文件,首先调出refs页,将原设edit mode选项取消,改设左上角的using exiting
calibration。重新将方法存盘,则今后再调用时即不需再作修改。
4.2.2.2.2 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。
4.2.2.2.3 按工具条中setup键,将主机设到该方法所设定的条件。
4.2.2.2.4 将参比溶液放入比色室,按autozero键做背景校零。
4.2.2.2.5 按start键,按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。
4.2.2.2.6 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中相应位置。
使用方法:开机步骤
1 开光谱仪电源
2 开计算机电源
3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作。
2 方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法。
1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描。
2)时间驱动(TIME DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学。
3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值。
4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度。
2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名。
2.2 方法的设定
2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动
各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示。
2.2.2 浓度
浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。
3 工具条
3.1 SETUP
当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态。
3.2 AUTOZERO
用鼠标指按此键,分光光度计即进行调零(在光谱扫描中则进行基线校正)。
3.3 START
用鼠标指按此键,光度计即开始运行所设定的方法。
4 方法运行
4.1 扫描,时间驱动,波长编程
方法选好后,先放入参比溶液,按AUTOZERO键,进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品,按START,分光光度计即开始进行,同时屏幕上出现图形窗口,将结果显示出来。
4.2 浓度
4.2.1制订标准曲线
1 方法选好后,确认各项数据正确,特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit mode”。再放入参比溶液,按AUTOZERO键自动校零或背景校正。
2 按setup,待该图标消失后,再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液,每次都按提示进行操作。
3 标准色列测定
完毕后,屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线,并标出各项标准管的位置,屏幕下方还有一条Concentration mode的对话框,可以用来修改拟合的曲线类型(按 change calbration),或修改标准溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加标准溶液管数(add)。如过已经满意,则按analyse sample键,进入样品测定窗口。
4 标准曲线有关的各项数据,均在calibresultwindow中,可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据,标准曲线的回程方程式,相关系数,残差。
4.2.2样品浓度测定
4.2.2.1刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时
1 只需在concentration mode对话框按analyse sample键,进入样品测定窗口。
2 按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。
3 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。
4.2.2.2利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时
4.2.2.2.1 调出所测定样品的浓度方法文件,首先调出refs页,将原设edit mode选项取消,改设左上角的using exiting
calibration。重新将方法存盘,则今后再调用时即不需再作修改。
4.2.2.2.2 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。
4.2.2.2.3 按工具条中setup键,将主机设到该方法所设定的条件。
4.2.2.2.4 将参比溶液放入比色室,按autozero键做背景校零。
4.2.2.2.5 按start键,按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作。
4.2.2.2.6 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中相应位置。
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2024-06-03
分光光度计的使用方法
1)预热仪器。为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。
2)选定波长。根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。
3)固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度读数为0.2-0.7,选择合适的灵敏度。为此,旋动灵敏度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
4)调节“0”点。轻轻旋动调“0”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。
5)调节T=100%。将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度T=100%,即表头指针恰好指在T=100%处。
6)测定。轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后,打开比色皿暗箱盖。
7)关机。实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
分光光度计的使用方法
1)预热仪器。为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。
2)选定波长。根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。
3)固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度读数为0.2-0.7,选择合适的灵敏度。为此,旋动灵敏度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
4)调节“0”点。轻轻旋动调“0”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。
5)调节T=100%。将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度T=100%,即表头指针恰好指在T=100%处。
6)测定。轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后,打开比色皿暗箱盖。
7)关机。实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
fenny80231
2024-05-25
紫外光分光光度计使用,使用前仪器要调零、调百校准,参比溶液又称空白溶液.测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液.通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线.有时,基体中虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试.经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去.否则将影响测定结果.在色谱分析中,有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰,计算机在数据处理中不会计入它们,不影响测定.
紫外光分光光度计使用,使用前仪器要调零、调百校准,参比溶液又称空白溶液.测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液.通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线.有时,基体中虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试.经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去.否则将影响测定结果.在色谱分析中,有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰,计算机在数据处理中不会计入它们,不影响测定.
艾米Amysweety
2024-05-11
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